Комплекс для анализа стабильности белков MicroCal PEAQ-DSC Automated
- Золотой стандарт анализа (термо)стабильности (белков/биомолекул) с минимальными требованиями к разработке метода
- Прямое исследование стабильности (нативного состояния) биомолекул в растворе без использования меток
- Высокая ёмкость и простота загрузки благодаря использованию стандартных 96-луночных планшетов, устанавливаемых в термостатируемом отделении
- Полностью интегрированный автосэмплер позволяет автоматически (без участия оператора) анализировать до 50 образцов в день
- Автоматическое заполнение и очистка ячейки обеспечивают возможность полностью автономной работы без участия оператора
Система MicroCal PEAQ-DSC Automated отличается высокой скоростью обработки и высокой чувствительностью и оснащена программным обеспечением, которое контролирует выполнение рабочих процессов благодаря использованию упрощенной экспериментальной установки и гибкого графика использования прибора. Автоматизированный анализ данных обеспечивает получение высоконадежных данных о термической стабильности в соответствии с нормативными требованиями. При этом полученные данные легко интегрируются с уже имеющимися данными и системами их передачи.
Дифференциальная сканирующая калориметрия (DSC) — это мощный аналитический инструмент для характеризации термической стабильности белков и других биомолекул. Этот метод используется для измерения энтальпии (ΔH) и температуры (Tm) структурных изменений молекул в растворе под воздействием температуры. Полученная информация позволяет сформулировать важные выводы о том, какие факторы обеспечивают стабилизацию или дестабилизацию белков, нуклеиновых кислот, мицеллярных комплексов и других макромолекулярных систем. Такие данные используются для прогнозирования срока годности биомолекулярных препаратов, включая биофармацевтические, для сравнения партий молекул и биоподобных молекул с инновационными, развития технологий очистки, характеризации и оценки белковых конструкций, а также для ранжирования сродства лигандов к их целевым белкам в программах разработки низкомолекулярных лекарственных препаратов.
1. PEAQ-Compliance: Система доступна в комплекте с контроллером (MAC) для ограниченного доступа к пользовательским SOP/СОП (Стандартизованные Операционные Процедуры) и алгоритмам анализа данных. Генератор Пльзовательских отчетов и электронные подписи для оптимальной интеграции с системой управления качеством, а также соответствие требованиям 21 CFR (Часть 11 и Приложение 11) — опциональный модуль.
2. PEAQ-Performance: Автоматическое определение и валидация готовности системы для оптимального функционирования.
3. PEAQ-Smart (включая PEAQ-Finder): Режим Стандартных Операционных Процедур (СОП/SOP) для измерения и анализа данных. Определение оптимальных алгоритмов для обнаружения малых и накладывающихся пиков, упрощет автоматическую объективную идентификацию сложных/множественных переходов, которые имеют место в многодоменных белках.
4. PEAQ-Compare: Сравнение профилей сканирования для оценки сопоставимости партий и биоподобия.
5. Network-ready: Отправка e-mail сообщений о статусе системы
Функциональные структуры, которые образуют белки и другие макромолекулы, часто претерпевают конформационные изменения, такие как разворачивание, под воздействием температуры. В результате этих изменений происходит поглощение тепла вследствие перераспределения нековалентных связей внутри молекулы. Дифференциальная сканирующая калориметрия очень точно измеряет это поглощение тепла.
Термический центр системы MicroCal PEAQ-DSC Automated состоит из кюветы для образца (содержит изучаемый образец) и контрольной кюветы (содержит буферный раствор), которые размещаются внутри изоляционного кожуха. В этих кюветах поддерживается постоянная температура, а во время измерения они подогреваются с постоянной скоростью сканирования.
В кювете для образца молекула разворачивается, поэтому тепло будет поглощаться, создавая разность температур (ΔT) кюветы для образца и контрольной кюветы. При этом в блоках Пельтье появляется температурный градиент, в результате чего возникает пропорциональное напряжение, которое в свою очередь преобразуется в мощность для формирования контура обратной связи с блоками Пельтье, чтобы уравнять температуру и привести ΔT к нулю.
Разворачивание белка является эндотермической реакцией, поэтому будет наблюдаться положительное смещение термограммы. Средняя точка перехода «плавления» белка обозначается как Tm, площадь участка под кривой соответствует энтальпии (ΔH) процесса разворачивания (см. рисунок ниже).
Основные параметры
|
|
Технология: |
Дифференциальная сканирующая калориметрия |
Анализируемые свойства: |
Средняя точка (TM) Энтальпия (ΔH) Изменение теплоемкости (ΔCp) |
Ячейка
|
|
|
Капиллярная |
Материал кюветы: |
Тантал |
Объём кюветы: |
130 мкл |
Образец
|
|
Вместимость (образцы): |
288 (6 × 96-луночные планшеты) |
Объем образца: |
325 мкл |
Стандартная концентрация образца: |
0,01 мг/мл – 10 мг/мл1 |
Скорость обработки образца: |
≤50 образцов/день |
Диапазон температур хранения образца: |
4 °C – 40 °C |
Модуль
|
|
Шум: |
0,05 мккал/°C 2 |
Повторяемость базовой линии: |
1 мккал/°C 2 |
Время отклика: |
5C2 |
Повторяемость: |
<0,2 мккал/°C 2 |
Воспроизводимость: |
<0,08 °C ст. отк. TM и <2% RSD для ΔH 4 |
Системная воспроизводимость: |
<0,1 °C ст. отк. TM и <5% RSD для ΔH 4 |
Режимы многократной обратной связи: |
Да (пассивный, с большим и с малым усилением) |
Диапазон температур: |
2 °C – 130 °C 2,5 |
Максимальная скорость сканирования: |
240 °C/ч |
Обратное сканирование: |
Да |
Пертурбационная калориметрия, с использованием возмущения давления (PPC): |
Н/Д |
Процедуры очистки: |
3 предварительно запрограммированные процедуры |
Чистящие растворители: |
Вода и чистящее средство используется в стандартном варианте |
Программное обеспечение
|
|
21 CFR Часть 11: |
Да, с дополнительным программным обеспечением PEAQ-Compliance |
Network-ready (сетевое подключение): |
Да, с возможностью получения электронных уведомлений |
Условия эксплуатации
|
|
Рабочая температура ( °C): |
От +10 °C до +28 °C |
Температура хранения: |
От -20°C до +50°C |
Влажность: |
10% – 70%, без конденсата (10% – 90% для хранения) |
Класс защиты от внешних воздействий (IP): |
IP21 |
Источник питания: |
100–240 В перем. тока, 50/60 Гц, 70 Вт (кювета), 400 Вт (макс., автоматический пробоотборник), ПК в комплекте |
Сертификация: |
CE (EN61010-1), EMC (EN61326-2-1, EN61326-1, FCC, ICES, VCCI), ISO9001:2008 |
Масса и габариты
|
|
Габариты (Ш, Г, В): |
101 см × 68 см × 70 см |
Вес: |
Приблизительно 25 кг |
Примечания
|
|
1) | Зависит от образца |
2) |
Стандартные результаты для рибонуклеазы (РНКазы) в буферном растворе 50 мМ KAc при pH 5,5, 60°C/ч с активной ответной реакцией |
3) |
Повторные сканирования стабильного буфера |
4) |
Использование рибонуклеазы (РНКазы) |
5) |
Диапазон температур по запросу может быть расширен до -10 °C |